???item.export.label??? ???item.export.type.endnote??? ???item.export.type.bibtex???

Please use this identifier to cite or link to this item: http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1036
???metadata.dc.type???: Tese
Title: Propagação e conservação in vitro de Martianthus leucocephalus (MART. ex BENTH.) J.F.B. PASTORE
???metadata.dc.creator???: Nepomuceno, Cristina Ferreira 
???metadata.dc.contributor.advisor1???: Santana, José Raniere Ferreira de
???metadata.dc.description.resumo???: Martianthus leucocephalus (Mart. ex Benth.) J.F.B. Pastore (Lamiaceae) é uma espécie medicinal aromática, endêmica do semiárido nordestino, possui importância econômica devido ao seu potencial farmacológico. Este trabalho teve como objetivo estudar a propagação in vitro da espécie Martianthus leucocephalus desenvolvendo um protocolo de micropropagação e conservação in vitro, permitindo o estabelecimento de estratégias para a sua preservação e exploração sustentável. No estabelecimento in vitro foram testados: 1 – testou-se diferentes meios de cultura (MS, MS½, WPM, Agar e Papel germtest) na germinação in vitro; 2 - testou-se diferentes meio cultura (MS, MS½ e WPM) no crescimento in vitro e 3 – avaliou-se diferentes volumes de meio de cultura (em frascos de 500mL) no crescimento in vitro de M. leucocephalus. No processo de morfogênese in vitro, testou-se: 1 - diferentes tipos de explantes (segmento de folha, segmento internodal e nodal) associado a diferentes citocininas (BAP, KIN e TDZ); 2 - combinação de diferentes concentrações de BAP e ANA; 3 - diferentes explantes quanto a posição deste no material de partida; 4 - diferentes fontes de carbono (sacarose, maltose, frutose, lactose e glicose); 5 - o potencial organogênico a partir de folhas com pecíolos submetidas a diferentes citocininas (KIN, BAP, TDZ e ZEA). Para aclimatização, as plantas passaram por um processo de rustificação, em que foram utilizados diferentes fechamentos dos tubos de ensaio. Na casa de vegetação as plantas foram transferidas para copos plásticos, contendo terra vegetal, sendo cobertas com garrafas tipo pet com tampa, depois de três dias as tampas foram desenroscadas, no décimo retiradas e no vigésimo primeiro dia as garrafas foram retiradas totalmente. Para o experimento de indução de calos embriogênicos, utilizou-se segmentos de folhas sob diferentes concentrações de 2,4-D e KIN, foi determinada a curva de crescimento a partir da matéria fresca dos calos até o 90º dia de cultivo, em intervalos de nove dias. Os carboidratos foram identificados e quantificados em HPLC. Para os estudos histológicos, as amostras foram fixadas FAA 70% e preparadas para análise em microscópia óptica, com emblocamento em historesina. As secções histológicas foram coradas com azul de toluidina (1%). Para conservação in vitro foram realizados dois experimentos: 1 – utilizou-se os retardantes vegetais: ancimidol ou paclobutrazol (0,0; 0,85; 1,7; 3,4 e 6,8µM) e 2 – avaliou-se diferentes agentes osmóticos (sacarose - Sac, manitol - Man e sorbitol - Sor) e diferentes concentrações (87,64; 131,46; 176,28; 219,10 e 262,92mM). Os agentes osmóticos manitol e sorbitol foram utilizados combinados com a sacarose. A germinação in vitro de M. leucocephalus deve ser realizada em meio de cultura MS½; a esterilização química é um método eficiente para o cultivo in vitro das duas espécies objeto de estudo desse trabalho; o meio de cultura MS é o mais indicado para o cultivo in vitro de M. leucocephalus e pode ser utilizado é 60mL de meio em frascos de 500mL. Apenas o segmento nodal apresentou resposta morfogenética, sendo que as citocininas promoveram baixa taxa de multiplicação. A multiplicação dos brotos pode ser realizada com 1,34µM de ANA, a partir de segmento nodal, a sacarose deve ser mantida como a melhor fonte de carbono para a morfogênese de M. leucocephalus, visto que, as fontes de carbonos alternativas de acordo as variáveis analisadas não superam a sacarose quanto à multiplicação dos brotos. Na organogênese a partir de folha com pecíolo, este mostrou potencial organogênico, porém é necessário testar outros meios de cultura de forma a favorecer maior regeneração dos explantes. As mudas obtidas podem ser aclimatizadas sem a necessidade de passar pelo processo de rustificação. Calos embriogênicos foram induzidos com 1µM de 2,4-D + 0,5µM de KIN, foi possível identificar as cinco fases de crescimento dos calos, durante o período de incubação dos calos embriogênicos, identificou-se três carboidratos: glicose, frutose e sacarose. Aos noves dias de incubação verificou-se a presença de embriões globulares, cuja ontogenia ocorreu a partir do sistema vascular e detectou-se o maior teor de glicose aos 9 e 18 dias de incubação. O ancimidol e o paclobutrazol promoveram decréscimos no crescimento das plantas, contudo a taxa de sobrevivência aos 240 dias foi inferior aos resultados obtidos com os agentes osmóticos. A conservação in vitro de M. leucocephalus pode ser realizada em meio de cultura suplementado com 43,82mM Sac + 43,82mM Man ou 65,73mM Sac + 65,73mM Man, uma vez que estes tratamentos promoveram taxa de sobrevivência em torno de 80%, além de reduzir o comprimento de parte aérea, número de folhas, número de folhas senescentes e promoveu ganho na matéria seca de parte aérea.
Abstract: Martianthus leucocephalus (Mart. ex Benth.) J.F.B. Pastore (Lamiaceae) is an aromatic medicinal specie, endemic to the semiarid Northeast, has economic importance due to their pharmacological potential. This work aimed to study the in vitro propagation of the specie Martianthus leucocephalus developing a protocol for in vitro micropropagation and conservation, allowing the establishment of strategies for their conservation and sustainable. In vitro establishment were carried out: 1 - test of different culture media (MS, MS ½, WPM, Agar and Paper germtest) in vitro germination; 2 - test of different medium culture (MS, MS ½ and WPM) on growth In vitro and 3 – assessement of different volumes of culture medium (in 500mL flasks) on in vitro growth of M. leucocephalus. In the process of morphogenesis in vitro, test: 1 - different types of explants (leaf segment, segment internodal and nodal) associated with different cytokinins (BAP, KIN and TDZ) 2 - combination of different concentrations of BAP and NAA; 3 - different explants at this position as the starting material, 4 - carbon sources (sucrose, maltose, fructose, lactose and glucose); 5 - organogenic potential from petioles sheets subjected to different cytokinins (KIN, BAP , TDZ and ZEA). For acclimatization, the plants have undergone a hardening process, which were used in various closures for tubes. In the greenhouse, plants were transferred to plastic cups containing potting soil, being covered with type pet bottles with lids, three days after the covers were desenroscadas, taken in the tenth and twenty-first day the bottles were removed completely. For the experiment of induction of somatic embryogenesis, we used segments of leaves under different concentrations of 2,4-D and KIN was determined from the growth curve of the fresh callus until the 90th day of culture at intervals of nine days. Carbohydrates were identified and quantified by HPLC. For histological studies, samples were fixed 70% FAA and prepared for analysis by optical microscope, with embedment in historesin. Histological sections were stained with toluidine blue (1%). For in vitro conservation Two experiments were conducted: 1 - we used the plant growth: ancymidol or paclobutrazol (0.0, 0.85, 1.7, 3.4 and 6.8 µM) and 2 - was evaluated different agents osmotic (sucrose - Sac, mannitol - Man and sorbitol - Sor) and different concentrations (87.64, 131.46, 176.28, 219.10 and 262.92 mM). Osmotic agents mannitol and sorbitol were used in combination with sucrose. The in vitro germination of M. leucocephalus should be performed in culture medium MS½; chemical sterilization is an effective method for the in vitro culture of two species object of study of this work, the MS medium is the most suitable for the in vitro culture of M. leucocephalus and can be used is 60mL of medium in 500 ml flasks. Only the nodal segment showed morphogenetic response, and cytokinins promoted low rate of multiplication. The multiplication of shoots can be performed with 1.34 µM of ANA from nodal segment, sucrose should be maintained as the best carbon source for the morphogenesis of M. leucocephalus, since the alternative carbon sources according to variables not outweigh sucrose as the multiplication of shoots. Organogenesis from leaf petiole with this potential organogenic shown, but it is necessary to test other culture media to favor higher regeneration of explants. The seedlings can be acclimatized without having to go through the process of hardening. Embryogenic calli were induced with 1μM 2,4-D + 0.5 µM KIN, it was possible to identify the five stages of callus growth during the incubation period of embryogenic calli identified three carbohydrates: glucose, fructose and sucrose . At nine days incubation verified the presence of globular embryos whose ontogeny occurred from the vascular system and detected the greatest glucose content at 9 and 18 days of incubation. The paclobutrazol and ancymidol promoted decrease in plant growth, however the rate of survival at 240 days was below the results obtained with the osmotic agents. The conservation in vitro M. leucocephalus can be carried out in culture medium supplemented with Sac + 43.82 43.82 mM mM mM Man or Sac + 65.73 65.73 mM Man, since these treatments promoted survival rate of approximately 80%, while reducing the length of shoots, number of leaves, number of senescent leaves and promoted gain in dry matter of the shoot.
Keywords: Lamiaceae
Embriogênese somática
Cultura de tecidos
Planta medicinal
Micropropagação
Somatic embryogenesis
Fabric culture
Medicinal plant
Micropropagation
???metadata.dc.subject.cnpq???: BOTANICA::FISIOLOGIA VEGETAL
Language: por
???metadata.dc.publisher.country???: Brasil
Publisher: Universidade Estadual de Feira de Santana
???metadata.dc.publisher.initials???: UEFS
???metadata.dc.publisher.department???: DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
???metadata.dc.publisher.program???: Doutorado Acadêmico em Botânica
Citation: NEPOMUCENO, Cristina Ferreira. Propagação e conservação in vitro de Martianthus leucocephalus (MART. ex BENTH.) J.F.B. PASTORE. 2012. 179 f. Tese (Doutorado Acadêmico em Botânica)- Universidade Estadual de Feira de Santana, Feira de Santana, 2012.
???metadata.dc.rights???: Acesso Aberto
URI: http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1036
Issue Date: 31-Aug-2012
Appears in Collections:Coleção UEFS

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
Tese_Cristina Ferreira.pdfArquivo em texto completo.5.92 MBAdobe PDFDownload/Open Preview


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.