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???metadata.dc.type???: Dissertação
Title: Caracterização molecular e avaliação de resistência a chumbo e cádmio em bactérias isoladas de rizosferas de plantas coletadas em Santo Amaro (BA)
???metadata.dc.creator???: Souza, Adriana Fidelis Couto 
???metadata.dc.contributor.advisor1???: Esposito, Elisa
???metadata.dc.description.resumo???: Na década de 60, a empresa de mineração Plumbum Mineradora foi instalada no Estado da Bahia, Brasil. Esta empresa, a qual produziu lingotes de chumbo por 33 anos, deixou mais de 400.000 toneladas de escória, a qual continha, dentre outros poluentes, cádmio e chumbo. Estes metais são, atualmente, encontrados no solo do entorno das antigas instalações da fábrica, em concentrações consideradas altamente tóxicas. Este estudo começou a investigar a biorremediação da área com o isolamento de bactérias das rizosferas de plantas locais, seguido por testar a tolerância das bactérias a esses metais. Finalmente, a identificação de bactérias foi feita baseada no marcador molecular 16S rRNA. O protocolo de isolamento foi realizado em meio de Agar Nutriente e após a obtenção de cultura pura, os isolados foram submetidos a testes de Concentração Inibitória Mínima (CIM). Cada isolado serviu de fonte para extrações de DNA para análise molecular com a região 16S rRNA. Dentre as rizosferas coletadas, as que mais se destacaram em relação a quantidade de espécies isoladas foram as plantas de hábito perene, dentre elas, a mamona (Ricinus comunis L.) e a embaúba (Cecropia pachystachya Trécul), que abrigaram juntas aproximadamente 38% de todas as espécies de bactérias obtidas. Interessante notar que da mamona (uma planta exótica no Brasil), 2/3 das bactérias foram Gram negativas, enquanto que da embaúba (uma planta nativa do Brasil), 3/4 das bactérias isoladas foram Gram positivas. Independentemente da classificação do Gram, as bactérias apresentaram maior resistência ao chumbo; 70% das Gram negativas apresentaram mudanças morfológicas acentuadas, enquanto que estas, nas Gram positivas, manifestaram-se em apenas 13%. Além disso, estas bactérias foram identificadas por meio de análise molecular, com o uso do marcador 16S rRNA. A metodologia usada foi baseada em análise de árvores de parcimônia e distância. Como resultado, a região 16S foi capaz de identificar 22% das espécies, enquanto que para o restante mostrou-se eficiente para classificação até gênero ou para agrupamentos infragenéricos. Portanto, os dados sugerem que as bactérias Gram negativas e Gram positivas possuem mecanismos de adaptações distintos em ambientes poluídos por chumbo e cádmio e que a região 16S não é eficiente como marcador universal tipo ‘código de barras’, o qual deve ser utilizado apenas como a primeira ferramenta de identificação de bactérias isoladas. Apesar deste estudo não servir como parâmetro definitivo para considerações ecológicas, ele fornece conhecimento sobre a influência do hábito da planta sobre a comunidade bacteriana e o papel da estrutura morfológica das bactérias (Gram) nos mecanismos de tolerância. Espera-se que estes dados possam ser explorados em estudos posteriores.
Abstract: In the 1960’ the mining company Plumbum Mineradora was installed in the Satate of Bahia, Brazil. This company, which produced lead ingots for 33 years, left over 400,000 tons of slag, which contained, among other pollutants, cadmium and lead. These metals are currently found in the soil surrounding the old factory, in concentrations considered highly toxic. A study was started to investigate possible bioremediation in the area with the isolation of bacteria from the rhizosphere of local plants, followed by the test in their performance in metals contaminant tolerance. Finally, identification of the bacteria was made based on molecular marker 16S rRNA. The isolation protocol was carry out using Nutrient Agar and after obtaining a pure culture. The isolates were then subjected to tests of Minimum Inhibitory Concentration (CIM). Each isolate served as a source for extraction of DNA for molecular analysis with 16S rRNA region. Among the rhizospheres collected, those from which the greatest number of species were isolated from plants with a perennial habit, among them the castor bean (Ricinus communis L.) and embaúba (Cecropia pachystachya Trécul) which together comprised approximately 38% of all species of bacteria obtained. Interestingly, from the castor bean (an exotic plant in Brazil), 2/3 of the bacteria were Gram negative, while from the embaúba (a native plant of Brazil), ¾ of the bacteria isolated were of Gram positive. Regardless of the classification of Gram, the bacteria studied showed higher tolerance to lead; 70% of Gram negative bacteria showed conspicuous morphological changes, whereas of those that were Gram positive, only 13% demonstrated. In addition, these bacteria have been identified by molecular analysis using the 16S rRNA marker. The used methodology based on analysis of parsimony and distance trees. As a result, the region 16S was able to identify only 22% of species while the remain species could only be identified to genus or to infra-generic groups. Therefore, the data suggest that the Gram negative and Gram positive bacteria have distinct mechanisms of adaptation in environments polluted by lead and cadmium and that the 16S region is not an efficient universal barcode marker, which should be used only as the first step on the identification of bacteria. Although this study does not provide a final parameter for ecological factors under consideration here, it provides an insight into the influence of the plant habitat on bacterial communites, and the role of Gram in the mechanisms of tolerance. It is hope to explore these aspects in the further studies.
Keywords: Santo Amaro
Rizobactérias
Resistência a metais
Contaminação por chumbo e cádmio
Análise molecular com 16S
Rhizobacteria
Metal resistance
Contamination by lead and cadmium
Molecular analysis with 16S
???metadata.dc.subject.cnpq???: CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOLOGIA GERAL
Language: por
???metadata.dc.publisher.country???: Brasil
Publisher: Universidade Estadual de Feira de Santana
???metadata.dc.publisher.initials???: UEFS
???metadata.dc.publisher.department???: DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
???metadata.dc.publisher.program???: Mestrado Acadêmico em Biotecnologia
Citation: SOUZA, Adriana Fidelis Couto. Caracterização molecular e avaliação de resistência a chumbo e cádmio em bactérias isoladas de rizosferas de plantas coletadas em Santo Amaro (BA). 2013. 213 f. Dissertação (Mestrado Acadêmico em Biotecnologia)- Universidade Estadual de Feira de Santana, Feira de Santana, 2013.
???metadata.dc.rights???: Acesso Aberto
URI: http://localhost:8080/tede/handle/tede/254
Issue Date: 13-Mar-2013
Appears in Collections:Coleção UEFS

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