@PHDTHESIS{ 2012:1997198440, title = {Propagação e conservação in vitro de Martianthus leucocephalus (MART. ex BENTH.) J.F.B. PASTORE}, year = {2012}, url = "http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1036", abstract = "Martianthus leucocephalus (Mart. ex Benth.) J.F.B. Pastore (Lamiaceae) é uma espécie medicinal aromática, endêmica do semiárido nordestino, possui importância econômica devido ao seu potencial farmacológico. Este trabalho teve como objetivo estudar a propagação in vitro da espécie Martianthus leucocephalus desenvolvendo um protocolo de micropropagação e conservação in vitro, permitindo o estabelecimento de estratégias para a sua preservação e exploração sustentável. No estabelecimento in vitro foram testados: 1 – testou-se diferentes meios de cultura (MS, MS½, WPM, Agar e Papel germtest) na germinação in vitro; 2 - testou-se diferentes meio cultura (MS, MS½ e WPM) no crescimento in vitro e 3 – avaliou-se diferentes volumes de meio de cultura (em frascos de 500mL) no crescimento in vitro de M. leucocephalus. No processo de morfogênese in vitro, testou-se: 1 - diferentes tipos de explantes (segmento de folha, segmento internodal e nodal) associado a diferentes citocininas (BAP, KIN e TDZ); 2 - combinação de diferentes concentrações de BAP e ANA; 3 - diferentes explantes quanto a posição deste no material de partida; 4 - diferentes fontes de carbono (sacarose, maltose, frutose, lactose e glicose); 5 - o potencial organogênico a partir de folhas com pecíolos submetidas a diferentes citocininas (KIN, BAP, TDZ e ZEA). Para aclimatização, as plantas passaram por um processo de rustificação, em que foram utilizados diferentes fechamentos dos tubos de ensaio. Na casa de vegetação as plantas foram transferidas para copos plásticos, contendo terra vegetal, sendo cobertas com garrafas tipo pet com tampa, depois de três dias as tampas foram desenroscadas, no décimo retiradas e no vigésimo primeiro dia as garrafas foram retiradas totalmente. Para o experimento de indução de calos embriogênicos, utilizou-se segmentos de folhas sob diferentes concentrações de 2,4-D e KIN, foi determinada a curva de crescimento a partir da matéria fresca dos calos até o 90º dia de cultivo, em intervalos de nove dias. Os carboidratos foram identificados e quantificados em HPLC. Para os estudos histológicos, as amostras foram fixadas FAA 70% e preparadas para análise em microscópia óptica, com emblocamento em historesina. As secções histológicas foram coradas com azul de toluidina (1%). Para conservação in vitro foram realizados dois experimentos: 1 – utilizou-se os retardantes vegetais: ancimidol ou paclobutrazol (0,0; 0,85; 1,7; 3,4 e 6,8µM) e 2 – avaliou-se diferentes agentes osmóticos (sacarose - Sac, manitol - Man e sorbitol - Sor) e diferentes concentrações (87,64; 131,46; 176,28; 219,10 e 262,92mM). Os agentes osmóticos manitol e sorbitol foram utilizados combinados com a sacarose. A germinação in vitro de M. leucocephalus deve ser realizada em meio de cultura MS½; a esterilização química é um método eficiente para o cultivo in vitro das duas espécies objeto de estudo desse trabalho; o meio de cultura MS é o mais indicado para o cultivo in vitro de M. leucocephalus e pode ser utilizado é 60mL de meio em frascos de 500mL. Apenas o segmento nodal apresentou resposta morfogenética, sendo que as citocininas promoveram baixa taxa de multiplicação. A multiplicação dos brotos pode ser realizada com 1,34µM de ANA, a partir de segmento nodal, a sacarose deve ser mantida como a melhor fonte de carbono para a morfogênese de M. leucocephalus, visto que, as fontes de carbonos alternativas de acordo as variáveis analisadas não superam a sacarose quanto à multiplicação dos brotos. Na organogênese a partir de folha com pecíolo, este mostrou potencial organogênico, porém é necessário testar outros meios de cultura de forma a favorecer maior regeneração dos explantes. As mudas obtidas podem ser aclimatizadas sem a necessidade de passar pelo processo de rustificação. Calos embriogênicos foram induzidos com 1µM de 2,4-D + 0,5µM de KIN, foi possível identificar as cinco fases de crescimento dos calos, durante o período de incubação dos calos embriogênicos, identificou-se três carboidratos: glicose, frutose e sacarose. Aos noves dias de incubação verificou-se a presença de embriões globulares, cuja ontogenia ocorreu a partir do sistema vascular e detectou-se o maior teor de glicose aos 9 e 18 dias de incubação. O ancimidol e o paclobutrazol promoveram decréscimos no crescimento das plantas, contudo a taxa de sobrevivência aos 240 dias foi inferior aos resultados obtidos com os agentes osmóticos. A conservação in vitro de M. leucocephalus pode ser realizada em meio de cultura suplementado com 43,82mM Sac + 43,82mM Man ou 65,73mM Sac + 65,73mM Man, uma vez que estes tratamentos promoveram taxa de sobrevivência em torno de 80%, além de reduzir o comprimento de parte aérea, número de folhas, número de folhas senescentes e promoveu ganho na matéria seca de parte aérea.", publisher = {Universidade Estadual de Feira de Santana}, scholl = {Doutorado Acadêmico em Botânica}, note = {DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS} }