@PHDTHESIS{ 2024:1666766195, title = {Uso da tecnologia CRISPR/Cas9 na edi??o de genes e valida??o de vetores para toler?ncia a estresses bi?ticos em bananeira (Musa spp.)}, year = {2024}, url = "http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1895", abstract = "As diversas doen?as causadas por fungos, oomicetos, bact?rias e pat?genos virais, comprometem o desenvolvimento das plantas afetando sua produtividade final. Para superar esses desafios, os programas de melhoramento buscam m?todos e t?cnicas para aprimorar o desempenho das culturas em cen?rios de estresses. A edi??o g?nica, via CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats), surge como uma ferramenta vers?til com potencial para desenvolver culturas tolerantes aos m?ltiplos estresses. O primeiro cap?tulo deste trabalho objetivou desenvolver uma revis?o sistem?tica da literatura gerada nos ?ltimos doze anos sobre o uso da tecnologia CRISPR na edi??o de genes para toler?ncia a estresses bi?ticos. Buscou-se avaliar artigos depositados em diferentes bases eletr?nicas, usando strings de busca e crit?rios de inclus?o e exclus?o predefinidos. Esta revis?o demonstrou que o sistema CRISPR/Cas ? aplicado em diversas esp?cies vegetais a fim de promover toler?ncia aos principais estresses bi?ticos. A maioria dos estudos foram desenvolvidos no continente Asi?tico, especificamente na China. A enzima Cas9 ? usada na maioria dos artigos, mas enzimas como Cas12 (Cpf1) e Cas13 tamb?m podem ser usadas como uma ferramenta adicional para edi??o de genomas. A revis?o tamb?m revelou v?rios genes editados por CRISPR e que as respostas das plantas aos fatores de estresse s?o mediadas por muitas vias de sinaliza??o complexas. Al?m disso, a qualidade dos artigos inseridos nesta revis?o foi atestada por meio de uma an?lise de risco de vi?s. No segundo cap?tulo, foram desenvolvidos duas constru??es/cassetes como produtos biotecnol?gicos contendo ou n?o promotor tecido-espec?fico de raiz de bananeira, al?m de utilizar a tecnologia CRISPR/Cas9 para o knockout do gene PDS (Fitoeno desaturase) na cultivar Prata-An?. Para isso, dois RNAs guias (gRNA) foram desenhados e dois vetores/constru??es foram confeccionados, suas partes foram isoladas, purificadas e transformadas em Agrobacterium tumefaciens. C?lulas embriog?nicas de bananeira Prata-an? foram utilizadas como explantes para transforma??o via A. tumefaciens. A partir desses m?todos foi poss?vel desenvolver um protocolo para constru??o e valida??o de vetores CRISPR/Cas para knockout de genes.", publisher = {Universidade Estadual de Feira de Santana}, scholl = {Doutorado Acad?mico em Biotecnologia}, note = {DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA} }