@PHDTHESIS{ 2025:381967225,
 	title = {Produ??o e caracteriza??o bioqu?mica de uma endoglucanase recombinante de Moniliophthora perniciosa (STAHEL) Aime & Phillips-Mora a partir de c?lulas de Escherichia coli},
 	year = {2025},
 	url = "http://tede2.uefs.br:8080/handle/tede/1901",
 	abstract = "As celulases s?o enzimas hidrol?ticas fundamentais para a convers?o da biomassa
 lignocelul?sica em a??cares ferment?veis, atuando na clivagem das liga??es ?-1,4-
 glicos?dicas da celulose, componente estrutural predominante da parede celular
 vegetal. Produzidas naturalmente por diversos microrganismos, os fungos
 filamentosos destacam-se como os principais produtores, em virtude de sua alta
 efici?ncia enzim?tica e secre??o extracelular. Entre esses, Moniliophthora perniciosa,
 um basidiomiceto patog?nico causador da vassoura-de-bruxa no cacaueiro
 (Theobroma cacao L.), secreta celulases termoest?veis como parte de sua estrat?gia
 infecciosa, sendo uma fonte ainda inexplorada para aplica??es biotecnol?gicas. Este
 estudo teve como objetivo, al?m de revisar os avan?os recentes na produ??o
 recombinante de celulases f?ngicas, descrever pela primeira vez a produ??o,
 purifica??o e caracteriza??o funcional da endoglucanase EG45 de M. perniciosa,
 expressa heterologamente em Escherichia coli. A revis?o de literatura evidenciou que
 diversos estudos relatam a express?o bem-sucedida de genes celulol?ticos de fungos
 filamentosos em sistemas heter?logos, especialmente em E. coli, devido ? sua f?cil
 manipula??o gen?tica, r?pido crescimento, elevada densidade celular e ampla
 disponibilidade de vetores de express?o. Essas tecnologias t?m viabilizado a
 produ??o em larga escala de coquet?is enzim?ticos otimizados, com ganhos
 significativos em rendimento, estabilidade e redu??o de custos, sobretudo para
 aplica??es em biorrefinarias. Na parte experimental, o gene EG45, com c?dons
 otimizados, foi clonado nos vetores pET28a e pET32a, sendo obtida express?o
 eficiente com o vetor pET32a na cepa E. coli Rosetta (DE3), induzida com IPTG (1
 mM) a 37??C por 4 horas. Uma banda de aproximadamente 38 kDa, compat?vel com
 o peso molecular previsto, foi detectada por SDS-PAGE em ambas as fra??es sol?vel
 e insol?vel. A purifica??o da fra??o insol?vel com solubiliza??o em ureia e refolding
 resultou em alta pureza, mas com concentra??o insuficiente para testes de atividade
 enzim?tica. Em contrapartida, a prote?na obtida da fra??o sol?vel apresentou
 rendimento satisfat?rio e permitiu os ensaios funcionais, revelando atividade ?tima a
 50??C e pH 6,0. Conclui-se que a produ??o recombinante da endoglucanase EG45 de
 Moniliophthora perniciosa, aqui descrita pela primeira vez, representa um avan?o
 importante tanto para a compreens?o da biologia desse fitopat?geno quanto para seu
 potencial uso industrial. A demonstra??o da atividade funcional da enzima refor?a a
 viabilidade da express?o heter?loga em E. coli como hospedeiro eficiente para a
 produ??o de enzimas f?ngicas ativas, com aplica??es promissoras na valoriza??o de
 res?duos agroindustriais e no desenvolvimento de tecnologias sustent?veis para a
 produ??o de biocombust?veis.",
 	publisher = {Universidade Estadual de Feira de Santana},
 	scholl = {Doutorado Acad?mico em Biotecnologia},
 	note = {DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA}
}