@MASTERSTHESIS{ 2015:480679216, title = {Expressão do receptor de vitamina D recombinante: um importante alvo biológico}, year = {2015}, url = "http://localhost:8080/tede/handle/tede/209", abstract = "O receptor de vitamina D (VDR) é um fator de transcrição gênica citoplasmático e, quando ativado pelo seu ligante, transloca-se para o núcleo e interage com regiões promotoras no DNA com a qual apresenta afinidade, atuando como fator modulador da transcrição gênica e assim produzindo múltiplos efeitos biológicos. Suas principais atividades são a regulação e a manutenção dos níveis plasmáticos de cálcio e fósforo, e apresenta atividades imunomoduladoras, como a supressão da ativação de células T, formação de padrões de secreção de citocinas, a modulação da proliferação e interferência na apoptose. Sendo assim, esse receptor representa um importante alvo de drogas que pode contribuir na descoberta de novos fármacos com ação imunomoduladora. O presente trabalho teve, como objetivo, produzir o VDR recombinante na forma solúvel para a realização de futuros ensaios de triagem de potenciais drogas com ação imunomoduladora e estudos de interação droga-receptor. Para isso, foi utilizado, inicialmente, o sistema de expressão em Escherichia coli, utilizando o plasmídeo HS_VDR_EC1-PQE T7, porém só foi possível obter a proteína na fração insolúvel, mesmo variando a temperatura, o tempo de indução e a concentração de IPTG. Na tentativa de obter o VDR solúvel, foi utilizado um sistema de expressão eucariótico em células de inseto, utilizando como vetor o baculovírus. Foi construído um vetor pFASTBacHT_VDR, o qual teve a sequência desta proteína clonada a partir do pCMX.VDR. A partir daí, foi possível obter bacmídeos recombinantes, utilizados na transfecção de células de inseto, gerando baculovírus recombinantes, para, então, seguir com a expressão do VDR.", publisher = {Universidade Estadual de Feira de Santana}, scholl = {Mestrado Acadêmico em Biotecnologia}, note = {DEPARTAMENTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS} }